Erfið og vatnsfælin peptíð nýmyndun

Erfitt peptíð nýmyndun|Sérsniðin vatnsfælin peptíð|Erfitt peptíð nýmyndun|Cluster Sequence Synthesis|Vísindi-Peptíð

Peptíð röð of vatnsfælin? Auðvelt að safna saman? Mörg pör af tvísúlfíðtengjum? Vísinda-Þjónusta Peptide's Difficult Peptide Synthesis og Hydrophobic Peptide Synthesis þjónustur sérhæfa sig í alls kyns "get ekki náð því". 20 ára reynslu, sérstökum leysikerfum, stöðugri afhendingu. Vinsamlegast ekki hika við að hafa samband við okkur.

Hvers konar peptíð eru talin „erfitt“?
Eftir að hafa verið í peptíðmyndunarbransanum í 20 ár hef ég séð alls kyns erfið peptíð. Þegar viðskiptavinir koma til okkar hafa þeir þegar spurt nokkur fyrirtæki og svarið sem þeir fá er annað hvort „Ég get það ekki“ eða „Prófaðu það, engin trygging“.

Peptíð með sterka vatnsfælni: yfirhimnusvæði, merkapeptíð, vatnsfælin amínósýra, þegar það er búið til mun það klumpast saman á resíninu og amínósýran á bak við það kemst ekki inn.
Peptíð sem auðvelt er að safna saman, eins og amyloid og örverueyðandi peptíð, hrúgast upp þegar þau eru mynduð og stífla súluna þegar hún er hreinsuð.
Peptíð með mörg pör af tvísúlfíðtengjum: fleiri en þrjú pör, eitt rangt skref í pörunarröðinni og öll sameindin er eyðilögð.
Langt peptíð: meira en 60 amínósýrur, hvert skref ávöxtunar minnkar og á endanum er ekkert eftir.
Flókin samsetning breytinga: fosfórun, flúrljómun, hringrás og aðstæður sem berjast hvert við annað.
Við getum tekið þá alla, og það er ekki "reyna", það er "hafa áætlun".

1. Vatnsfælin peptíð: með sérhæfðum leysikerfum
Erfiðleikarnir við vatnsfælin peptíð liggja í því að ekki er hægt að leysa þau upp í hefðbundnum leysum og þegar þau eru mynduð „kekkist peptíðkeðjan saman“ á plastefninu, sem gerir það að verkum að amínósýrurnar á bakvið það komast ekki inn.

Lausnin okkar:
Sérstök leysiefnasamsetning: DMF, NMP, DCM blandað kerfi, auk smá fljótandi losunarefnis, þannig að peptíðkeðjunni hefur verið haldið teygð.
Hitastilling: sum viðbrögð eru betri við 40 gráður en stofuhita, sum þarf að lækka niður í 0 gráður, við höfum prófað þau eitt af öðru.
Val á trjákvoðu: Notaðu trjákvoða með mikilli leysni fyrir vatnsfælin peptíð til að skilja eftir nóg pláss fyrir peptíðkeðjur.
Leysanleg merki: Ef þú getur það ekki skaltu bæta við vatnssæknum merkimiða og skera það af eftir myndun.

Raunverulegt tilfelli: 35aa transmembrane peptíð, vatnsfælnar amínósýrur voru 70%, viðskiptavinurinn leitaði að þremur fyrirtækjum er ekki hægt að gera. Við breyttum leysikerfinu og bættum við lausnarmerkinu, loksins var hreinleikinn 92% og viðskiptavinurinn gerði skipulagsrannsóknina vel.

2. Mörg pör af tvísúlfíðtengjum: engin heppni, stefna
Því fleiri tvísúlfíðtengi sem eru, því erfiðara er að para þau. Tvö pör eru í lagi, en þrjú eða fleiri pör, og eitt rangt skref og það er allt búið.
Stefna okkar:
Réttrétt vernd: Hægt er að opna Cys og para saman í skrefum með því að nota mismunandi verndarhópa, eins og Trt, Acm, tBu.
Hagræðing oxunarskilyrða: loftoxun, glútaþíonoxun, joðoxun, mismunandi aðferðir fyrir mismunandi peptíð.
Millistig QC: Eftir hvert par skal taka sýni fyrir MS og staðfesta pörunina áður en haldið er áfram.
MS/MS staðfesting (valfrjálst): endanleg sundurliðun- með aukamassagreiningu til að sjá hvar tvísúlfíðtengin eru í raun tengd.

A real case: A conotoxin peptide containing four pairs of disulfide bonds was rejected by many companies. We designed a four-step oxidation strategy, which took six weeks, and delivered >90% hreinleiki, rétt pöruð tvísúlfíðtengi og kristalbyggingin var síðan leyst af viðskiptavininum.

3. Aggregation-tilhneigingu til peptíða: myndast á meðan þau verjast
Sum peptíð elska náttúrulega að safnast saman, svo sem amyloid prótein og bakteríudrepandi peptíð. Þær byrja að safnast saman þegar þær eru tilbúnar, loka á súluna þegar þær eru hreinsaðar og ekki er hægt að leysa þær upp þegar þær eru í höndunum.
Lausnin okkar:
Pseudoproline: Pseudoprolin er kynnt í Ser/Thr stöðu til að trufla samloðunahneigð og breytast aftur eftir myndun.
Hlutamyndun: Peptíð sem eru of fjölliðuð eru skorin í nokkra hluta og mynduð sérstaklega og síðan tengd aftur í lokin.
Hagræðing á hreinsunarskilyrðum: hátt hitastig, súrt pH, bætt við lífrænum leysum til að finna aðstæður sem gera það að verkum að það er ekki-fjölliðunarlaust.

4. Flóknar samsetningar breytingar: aðstæður án slagsmála
Sum peptíð hafa margar kröfur: fosfórun, flúrljómandi merkingu og hringrás. Þessar breytingar geta stangast á - til dæmis, fosfórun er sýru-fæln, flúrljómandi merking er létt-fæln og hringmyndun krefst ákveðins pH.
Nálgun okkar:
Hönnun verndarstefnu: hvaða klippingu á að gera fyrst, hvaða klippingu á að gera síðar, hannað fyrirfram.
Rétthyrndar aðstæður: Skilyrði hvers þreps hvarfsins hafa ekki áhrif á þær breytingar sem þegar hafa verið gerðar.
Millistig QC: Eftir hvert skref breytinga skaltu taka sýni til að ganga úr skugga um að það sé gert rétt áður en þú heldur áfram.

5. Hreinleiki: Fer eftir því hvað þú ert að gera við það

Hverju peptíð fylgir HPLC og MS skýrsla, sem gerir hreinleikagögnin gagnsæ.

1. Við höfum gert þetta í 20 ár
Erfið peptíðmyndun er ekki eitthvað sem hver sem er getur gert. Í gegnum árin höfum við höndlað mikið af erfiðum peptíðum: yfirhimnuprótínum, veirusamrunapeptíðum, kótoxínum, amyloidpróteinum, örverueyðandi peptíðum osfrv. Við höfum góða hugmynd um hvaða raðir eru viðkvæmar fyrir vandamálum og hvaða aðstæður geta bjargað þeim. Þú þarft að minnsta kosti ekki að prófa hvern og einn af þeim ef þú kemur til okkar í erfiða og vatnsfælna peptíðmyndun.

2. Það er ekki "reyna", það er "hafa forrit".
Mörg fyrirtæki taka á sig erfið peptíð og segja: "Við reynum það, en við ábyrgjumst það ekki". Við spilum ekki þannig. Áður en við samþykkjum pöntun munum við meta röðina, hvert er hlutfall vatnsfælna amínósýra, hvort það sé einhver þekkt samsöfnunartilhneiging, hversu mörg pör af tvísúlfíðtengjum og hvort breytingin sé flókin eða ekki. Eftir mat munum við segja þér: hver er árangurinn og hversu langur hringrásartíminn er.

Við tökum ekki við skipunum sem ekki er hægt að gera og við verðum að afhenda pantanir sem við höfum tekið.

3. Sérhæfð leysikerfi fyrir vatnsfælni
Vatnsfælin peptíð er okkar sterka hlið. Ef ekki er hægt að leysa hefðbundna leysirinn upp munum við skipta um leysi; ef hefðbundið hitastig bregst ekki, munum við stilla hitastigið; ef hefðbundið plastefni heldur ekki út, munum við skipta um plastefni. Það er líka uppleysandi merki sem bakleið út.

4. Mörg pör af tvísúlfíðtengjum, skref-fyrir-skref
Ef það eru fleiri en þrjú pör af tvísúlfíðtengjum munum við taka skref-fyrir-skref nálgun: fyrsta skrefið er að vernda A og opna fyrsta parið; vernda B og opna annað parið; vernda C og opna þriðja parið. Eftir hvert skref tökum við sýni fyrir MS og staðfestum pörunina áður en haldið er áfram. Að lokum verður MS/MS brotið og staðfest og gögnin færð þér án þess að þú getir giskað á það.

5. Gæðaeftirlit: gögn í hverju skrefi
Gæðaeftirlit með erfiðum peptíðum þarf að vera varkárara:
Millistig QC: Eftir hvert brot og hvert breytingaskref skal mæla hreinleika og mólmassa fyrst.
Lokaafurð: HPLC fyrir hreinleika, MS fyrir mólmassa.
Leysnipróf: Gefðu ráðlagða leysiefni og leysniaðferðir, svo að þú fáir ekki peptíð sem leysast ekki upp.
Að gera erfiða og vatnsfælna peptíðmyndun, gögnin tala sínu máli, hægt er að rekja hvert skref.

• Afhendingarform: frostþurrkað duft, skilvindurör eða hettuglös.
• Fylgiskjöl: COA (HPLC snið + MS litróf), nýmyndun skýrsla (valfrjálst).
• Valfrjáls próf: Peptíðinnihald, endotoxín, raki, amínósýrusamsetning, leysnipróf.
• Sérsniðnar umbúðir: skammta og merkja í samræmi við kröfur þínar.
• Sérhver erfið og vatnsfælin peptíðmyndun vara er endurskoðuð til að tryggja að röðin sé rétt og hreinleikin sé í samræmi við staðal áður en hún er send út.

Hvort sem þú hefur verið hafnað af öðrum, eða þú getur ekki gert það á eigin rannsóknarstofu, geturðu talað við okkur. Ef þú ert að leita að Vísinda-peptíð til að gera erfiða og vatnsfælna peptíðmyndun, þarftu að minnsta kosti ekki að prófa eitt í einu.

Ég þarf að segja mér:
Peptíðröð (eða markupplýsingar)
Hefur þú látið einhvern annan gera það áður? Hver er niðurstaðan?
Hversu mikið (milligrömm)
hreinleikakröfur

Hvenær vilt þú það?

Gefðu þér hagkvæmnismat og tilboð í dagskrá innan 24 klukkustunda.